1、外植體
外植體類型對植物的組織培養(yǎng)工作有著明顯的影響作用,是控制組培有效性的重要因素條件。在理論內(nèi)容上,植物中的各個組織器官,都可以在組織培養(yǎng)技術(shù)的支撐下完成生長發(fā)育。但在大量的研究數(shù)據(jù)中,木本植物的不同外植體提取部位,與其整體植株的發(fā)育階段有著明顯的關(guān)聯(lián)性,會在不同的生長發(fā)育時期,展現(xiàn)出差異化的特征表現(xiàn)。在對木本植物的外植體進行采集的過程中,需根據(jù)具體的組織培養(yǎng)目標、快繁方法、生物習(xí)性特征,對其外植體的類型進行選擇。通常情況下,在木本觀賞植物的外植體選擇中,都會定位那些幼嫩的植物組織與器官,并在莖尖、嫩芽、幼葉、胚、子葉等結(jié)構(gòu)的采集中,保證技術(shù)應(yīng)用外植體的合理性使用狀態(tài)。同時,針對一些特殊性的需求內(nèi)容,也會對植物的莖段、成熟葉片、根、花等具體器官進行外植體采集。
例如,在對木本觀賞植物莖段與幼芽進行誘導(dǎo)愈傷試驗的處理過程中,可以在相同培養(yǎng)條件下形成對比分析。實際處理中,將幼芽作為外植體材料進行愈傷處理,表現(xiàn)出較高的誘導(dǎo)率水平,并在快速生長的愈傷組織中,明顯的優(yōu)于植物莖段結(jié)構(gòu)的愈傷組織生成。
另外,將蘋果作為具體的實驗對比組,可以對其植株葉片進行培養(yǎng)處理,并由此分析不同葉子生長技術(shù)要素。實驗發(fā)現(xiàn),相同條件的植物組織生長培養(yǎng),葉梢位置的幼葉,有明顯的再生能力優(yōu)勢;而在獨立葉片中,葉片中部的組織結(jié)構(gòu),有更強的生長能力,并在葉片接近葉柄的位置,有較快的愈傷組織發(fā)展能力。
2、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)過程中的基礎(chǔ)物質(zhì),是為被培養(yǎng)組織提供營養(yǎng)物質(zhì)的基本條件,不同培養(yǎng)基組成,對植物生長有著明顯的影響效果。在大多數(shù)植物組織的培養(yǎng)中,通常會在培養(yǎng)基中加入無機營養(yǎng)物質(zhì)、有機添加物、碳源、植物生長調(diào)節(jié)劑、凝膠凝劑等材料。
不同類型的植物,或是外植體材料,在培養(yǎng)基適應(yīng)能力上,也表現(xiàn)出明顯的差異性。在B5培養(yǎng)基中,莖段愈傷組織的誘導(dǎo)率,要明顯地優(yōu)于葉片;而在MS培養(yǎng)基中,這種優(yōu)勢條件就會發(fā)生互換,使葉片的誘導(dǎo)率高于莖段。
在對組織培養(yǎng)工作進行控制的過程中,會針對不同的需要條件,對組織培養(yǎng)的階段與目標進行調(diào)整,在這一變化條件下,也會使培養(yǎng)基的基本成分發(fā)生變化。例如,在對毛葉棗進行組織培養(yǎng)的過程中,對于驅(qū)動與增殖階段,可以使用MS培養(yǎng)基,但需要在生根階段的培養(yǎng)中,將MS培養(yǎng)基縮減到50%的程度,才可以更好地完成制作培養(yǎng)。又如,在誘導(dǎo)銀杏莖段愈合的處理中,也可以應(yīng)用MS培養(yǎng)基,并將50%MS培養(yǎng)基應(yīng)用在分化芽階段,對于根部誘導(dǎo)與生成,則將培養(yǎng)基更換為White,以此保證整體培養(yǎng)流程的效率化條件。
3、激素
植物組培中,外源物質(zhì)激素中種類、質(zhì)量、配比是影響技術(shù)應(yīng)用條件的重要因素。在類型選擇上,植物生長素、細胞分裂素、赤霉素、乙烯、脫落酸等常規(guī)的植物激素,都可以作為有效的應(yīng)用條件,對植物的組織生長起到一定的刺激作用。同時,也可以應(yīng)用到油菜素甾體等物質(zhì),對植物組培進行調(diào)節(jié)。
木本觀賞植物的組織培養(yǎng)中,6-BA、ZT、KT、TDZ等物質(zhì),都是常見的細胞分裂素類激素。在此類的激素類物質(zhì)的刺激作用下,植物組織在組培過程中,會在分化與增殖的過程中,表現(xiàn)出明顯的優(yōu)化效果。以應(yīng)用最為廣泛的6-BA為例,在對野生荔枝種子進行組織培育的過程中,在其培養(yǎng)基材料中,可以發(fā)現(xiàn)濃度高達20mg/L的6-BA激素物質(zhì),證明了此類激素對于分裂的影響作用。而相同類型的激素物質(zhì),也存在一定的差異性,以6-BA與KT為例,6-BA可以有效的促進細胞的分裂狀態(tài),并在愈傷組織的形態(tài)建成中,起到了積極的作用。而KT對于愈傷組織則沒有明顯的影響條件,但將其添加到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中后,可以對愈傷組織的生成質(zhì)量起到改善與優(yōu)化作用。
4、其他添加物
木本觀賞植物的組織培養(yǎng)處理中,必要時可以加入有機物質(zhì),作為外源添加物,以此提高組培的有效性。而對于椰子乳、谷氨酰胺、活性炭、青霉素、核黃素等添加物的使用,已經(jīng)成為了此類組培處理中的常態(tài)化技術(shù)。在實務(wù)操作中,為了對幼苗的生長進行強化,可以在其培養(yǎng)過程中,向培養(yǎng)基中加入適當(dāng)?shù)某嗝顾?而在向培養(yǎng)基中添加活性炭之后,可以提高生根苗的生長質(zhì)量。因此,不同狀態(tài)類型的添加物質(zhì),會對植物的組織培養(yǎng)條件起到差異的積極影響作用。
5、培養(yǎng)環(huán)境
培養(yǎng)環(huán)境,由光照、溫度、濕度、時間、繼代次數(shù)等多種條件組成,對木本植物的組織培養(yǎng)工作,產(chǎn)生著不同條件的影響效果。例如,在對赤桉葉片進行不定芽誘導(dǎo)組織培養(yǎng)的過程中,可以先進行10d的暗環(huán)境培養(yǎng),然后再進行每天16h的光暗交替培養(yǎng)。在這一交替條件下的培養(yǎng)效果,要明顯的優(yōu)于全光環(huán)境中的不定芽誘導(dǎo),而在暗培養(yǎng)過程中,隨著時間的延長,會愈發(fā)縮減不定芽的誘導(dǎo)概率。由此,也體現(xiàn)出了光照條件下,培養(yǎng)環(huán)境對于組織培養(yǎng)有效性的影響。
而從溫度條件出發(fā),在不同的溫度環(huán)境中,也會對組織培養(yǎng)的效果造成影響。甚至在光、暗協(xié)調(diào)配合下的溫度周期,也會對整體組織培養(yǎng)工作造成影響。在此項技術(shù)理論的影響下,說明了培養(yǎng)環(huán)境各項影響因素的綜合性,并非獨立數(shù)據(jù)下的個體影響表現(xiàn),在各個影響要素之間,也存在著相應(yīng)的關(guān)聯(lián)性條件,最終匯聚在對于植物組織培養(yǎng)的影響效果中。
綜上,木本觀賞植物的組織培養(yǎng),是優(yōu)化組培技術(shù)應(yīng)用空間的重要條件,也是補充木本觀賞植物應(yīng)用空間的有效技術(shù)手段。通過對其基本技術(shù)理論內(nèi)容與應(yīng)用價值的介紹,在影響內(nèi)容中,說明此項技術(shù)的應(yīng)用條件,可以形成完整的技術(shù)指導(dǎo)條件,為整體技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用提供基礎(chǔ)性成長動力。
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